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完好的人ELISA試劑盒包含哪些組分呢？

更新時間：2019-10-26      瀏覽次數(shù)：1388
 　　完好的人ELISA試劑盒包含哪些組分呢？
　　在人ELISA試劑盒實驗中，只需遵從它應(yīng)有的規(guī)矩才干更好的完成實驗，對此，為您分析了保證實驗效果的幾大基礎(chǔ)：
　　1.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都康復(fù)到室溫，以使效果更安穩(wěn)。
　　2.實驗時，要使底物避光保存。
　　3.用槍羅致液體時速度不能太快，避免發(fā)作氣泡而使羅致量不。
　　4.羅致液體時，要用量程和需要量靠近的槍去吸，削減過失。
　　5.要保證移液槍的性，過失不能超過2%。可用水和電子天平進行確認。但有專。人員進行糾正。
　　6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。羅致不同的液體后，要更換槍頭。即使是羅致標準品時。
　　ELISA中有三個必要的試劑：免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等
　　完好的人ELISA試劑盒包含以下各組分：
　　1.已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
　　2.酶符號的抗原或抗體(結(jié)合物)；
　　3.酶的底物；
　　4.陰性對照品和陽性對照品(定性測定中)，參考規(guī)范品和控制血清(定量測定中)；
　　5.結(jié)合物及標本的稀釋液；
　　6.洗刷液
　　7.酶反響停止液。
　　人ELISA試劑盒操作過程：
　　1. 加規(guī)范品：在酶標包被板上設(shè)規(guī)范品孔，依次參加不同濃度的規(guī)范品50ul(主張每個濃度做2個平行孔)
　　2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其他各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品40μl，然后再加樣品親和素10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，悄悄晃動混勻。
　　3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
　　4. 配液：將30倍濃縮洗刷液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
　　5. 洗刷：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗刷液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
　　6. 加酶：除空白孔外每孔參加酶標試劑50μl。
　　7. 溫育：操作同3。
　　8. 洗刷：操作同5。
　　9. 顯色：ELISA試劑盒每孔先參加顯色劑A50μl，再參加顯色劑B50μl，悄悄震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
　　10. 停止：每孔加停止液50μl，停止反響(此刻藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
　　11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序丈量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加停止液后15分鐘以內(nèi)進行。
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