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ELISA試劑盒使用中的十個要領(lǐng)

更新時間：2022-05-26      瀏覽次數(shù)：1490
　　ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復(fù)性好的ELISA試劑盒，其試劑安穩(wěn)、易保留、操作簡練、作用區(qū)分客觀等要素，適宜于大規(guī)模篩查實驗又能夠用于少數(shù)標(biāo)本的檢查，能夠做定性實驗也能夠做定量分析。
　　ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被人心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結(jié)合蛋白（h-FABP）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
　　ELISA試劑盒在使用時的要領(lǐng)：
　　1、試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
　　2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
　　3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間醉好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
　　4、請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，醉好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第—孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請醉后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
　　5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
　　6、底物請避光保存。
　　7、嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
　　8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
　　9、本試劑不同批號組分不得混用。
　　10、如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。
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